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La homofobia interiorizada se trata de un constructo importante para el desarrollo y la salud física y mental de lesbianas, gays y bisexuales, sin embargo, su operacionalización ha sido constantemente criticada y señalada como complicada, por su contenido, por sus propiedades psicométricas y por la influencia cultural con la que cuentan las escalas. El propósito del presente estudio fue la construcción de una escala de homofobia interiorizada culturalmente relevante para adultos LGB, así como la identificación de sus dimensiones y la evaluación de sus propiedades psicométricas de validez de constructo y confiabilidad. Participaron 782 voluntarios con una edad entre 18 a 52. A través de un análisis factorial exploratorio se obtuvo una escala con 22 ítems distribuidos en cuatro factores, los cuales explicaron el 54.38% de la varianza. Un análisis de consistencia interna mostró un alfa de Cronbach de 0.92. Los resultados se discuten a la luz de diversas teorías y modelos de medida propuestos sobre la homofobia interiorizada. Este estudio respondió a diversas críticas sobre la operacionalización de este constructo, además proporcionó un nuevo instrumento válido y confiable que mantiene y agrega nuevos elementos a este constructo.